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BD流式細胞儀的陽性判斷簡介

更新時間:2017-06-28瀏覽:3631次

  使用BD流式細胞儀分析的主要目的在于區(qū)分細胞對于檢測指標是陽性還是陰性,或計算陽性細胞與陰性細胞的比例。這就需要準確的儀器設置及良好的實驗重復性,分析時運用恰當對照及分析方法。各種不同的流式細胞儀實驗需要不同的陰性對照,因而也是一些爭論及討論的焦點。

  在BD流式細胞儀實驗中為基礎的問題是哪些染色的細胞是陽性或陰性,或?qū)τ谀骋粯酥疚镪栃约毎蜿幮约毎谋壤嵌嗌?。要回答這個問題需要仔細調(diào)節(jié)儀器并使用對照品。

  首先,探測器的增益需調(diào)節(jié)準確從而獲得佳的靈敏度,熒光補償必須設置正確,從而避免出現(xiàn)虛假或不必要的錯誤結(jié)果。

  第二,對于沒有明顯雙峰分布(陽性峰)的樣本,需要做設門對照。在某些情況下,生物比較樣本(如未刺激的細胞)可提供佳的設門對照來決定細胞陽性范圍。在某些不可能獲得生物比較樣本的情況下,可使用同型對照或FMO對照。以上這些并不是所有的選擇,選擇何種方式取決于是熒光滲漏或抗體非特異性結(jié)合對實驗的影響大小。初,可通過檢測多種對照來決定哪一個更適合于定義陽性、陰性界線。在任何實驗中都須避免因為沒有充分考慮而使用不恰當?shù)膶φ掌?。堅持使用?jīng)實驗證明的設門方法將有助于標準化BD流式細胞儀分析項目來解答重要的臨床問題。

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